polymerase kædereaktion (PCR) - en metode til molekylærbiologi, som giver dig mulighed for at opdage det biologiske materiale i små mængder deoxyribonukleinsyre (DNA), eller rettere, nogle af dens fragmenter, og formere dem mange gange.Derefter blev de identificeret visuelt ved gelelektroforese.Reaktion blev udviklet i 1983 af K. Mullis og medtaget på listen over udestående opdagelser af de seneste år.
Hvilke mekanismer PCR
hele teknik er baseret på evnen af nukleinsyrer til uafhængig replikation, som i dette tilfælde er gennemført kunstigt under laboratorieforhold.DNA-replikation kan ikke begynde i en region af molekylet, men kun i visse områder med nukleotidsekvensen - startende fragmenter.For at polymerasekædereaktionen er startet, primerne brug (eller DNA-prober).Denne korte fragmenter af DNA-strengene med en forudbestemt nucleotidsekvens.De er komplementære (dvs. passende) start lokaliteter af DNA-prøven.
kursus for at skabe primere, forskerne skal studere nukleotidsekvensen af nukleinsyre, som er involveret i proceduren.Disse DNA-sonder giver specificitet af reaktionen og dens indvielse.Polymerasekædereaktion vil ikke gå, hvis prøven ikke finde mindst ét molekyle af den ønskede DNA.Generelt kræver omsætningen ovennævnte primere, et sæt af nukleotider, varmebestandig DNA-polymerase.Sidstnævnte er et enzym - katalytiske reaktioner til syntese af nye nukleinsyremolekyler baseret på prøven.Alle disse stoffer, herunder biologisk materiale, som er nødvendig for at identificere DNA kombineres i reaktionsblandingen (opløsning).Den er placeret i en særlig termostat, der udfører sin meget hurtig opvarmning og afkøling inden for den angivne tid - cyklus.Normalt er de 30-50.
Hvordan er denne reaktion
Essensen af det er, at i løbet af en cyklus af primerne er knyttet til den ønskede del af DNA, hvorefter den fordobling af enzymet.På grundlag af den resulterende DNA-streng syntetiseres i de efterfølgende cyklusser og flere identiske molekylfragmenter.
polymerasekædereaktion er konsekvent efter frigivelse etape.Det er kendetegnet ved først at fordoble mængden af produktet under hver cyklus af opvarmning og afkøling.I det andet trin af reaktionen bremset, idet enzymet er beskadiget og mister aktivitet.Desuden er de ozonlagsnedbrydende reserver og nucleotidprimere.I den sidste fase - et plateau - produkterne er ikke længere indsamlet som reagenser forbi.
Hvis det bruges
Utvivlsomt, den bredeste program polymerasekædereaktion er i medicin og videnskab.Dens anvendelse i offentlig og privat biologi, veterinærmedicin, farmaci, og selv miljøet.Mens sidstnævnte gør for at overvåge fødevarernes kvalitet og miljømæssige objekter.Bruges aktivt polymerasekædereaktion i retsmedicinske praksis at bekræfte faderskab og identifikation af en person.Den retsmedicinske lægeundersøgelse, samt i palæontologi, denne teknik er ofte den eneste vej ud, som det er normalt tilgængelige for forskning meget lille mængde DNA.Selvfølgelig er en meget udbredte metode findes i praksis af medicin.Han har brug for det på områder som genetik, infektionssygdomme og cancer.
