reacción en cadena de la polimerasa (PCR) - un método de biología molecular, que permite descubrir el material biológico en pequeñas cantidades de ácido desoxirribonucleico (ADN), o más bien, algunos de sus fragmentos, y los multiplicaré muchas veces.Luego se identificaron visualmente por electroforesis en gel.La reacción fue desarrollado en 1983 por K. Mullis y se incluye en la lista de descubrimientos sobresalientes de los últimos años.Toda
¿Qué mecanismos PCR
técnica se basa en la capacidad de los ácidos nucleicos a la replicación independiente, que en este caso se realiza artificialmente en condiciones de laboratorio.La replicación del ADN no puede comenzar en cualquier región de la molécula, pero sólo en ciertas áreas con la secuencia de nucleótidos - a partir de fragmentos.A fin de que la reacción en cadena de polimerasa ha comenzado, los cebadores necesita (o sondas de ADN).Este corto fragmentos de hilos de la DNA con una secuencia de nucleótidos predeterminada.Son complementarios (es decir, el caso) iniciar los sitios de muestra de ADN.Por supuesto
para crear cebadores, los científicos deben estudiar la secuencia de nucleótidos del ácido nucleico, que está implicado en el procedimiento.Estas sondas de ADN proporcionan especificidad de la reacción y su iniciación.Reacción en cadena de polimerasa no irá, si la muestra no encuentra al menos una molécula de ADN deseado.En general, la reacción requiere los cebadores anteriores, un conjunto de nucleótidos, ADN polimerasa resistente al calor.Este último es una enzima - reacciones catalíticas de la síntesis de nuevas moléculas de ácido nucleico basados en la muestra.Todas estas sustancias, incluyendo la materia biológica, que es necesaria para identificar el ADN combinado en la mezcla de reacción (solución).Se coloca en un termostato especial que realiza su muy rápida calentamiento y enfriamiento dentro del tiempo especificado - de ciclo.Suelen ser 30-50.
Cómo es esta reacción
La esencia de esto es que durante un ciclo de los cebadores se unen a la parte deseada de ADN, después de lo cual se duplica por la enzima.Sobre la base de la cadena de ADN resultante sintetizado en los ciclos posteriores y fragmentos de moléculas más idénticos.
reacción en cadena de la polimerasa está siguiendo sistemáticamente su etapa de liberación.Se caracteriza por primera duplicando la cantidad de producto durante cada ciclo de calefacción y refrigeración.En la segunda etapa de la reacción se ralentiza, ya que la enzima está dañado y pierde actividad.Además, las reservas de ozono y cebadores de nucleótidos.En la última etapa - una meseta - los productos ya no están recogidas como reactivos terminado.
Dónde se utiliza
Sin duda, la reacción en cadena de la polimerasa aplicación más amplia se encuentra en la medicina y la ciencia.Su uso en biología pública y privada, la medicina veterinaria, farmacia, e incluso el medio ambiente.Mientras que este último están haciendo para monitorear la calidad de los alimentos y objetos del entorno.Utilizado activamente la reacción en cadena de la polimerasa en la práctica forense para confirmar la paternidad y la identificación de una persona.El examen médico forense, así como en la paleontología, esta técnica es a menudo la única manera de salir, ya que suele estar disponible para la investigación muy pequeña cantidad de ADN.Por supuesto, un método muy ampliamente utilizado se encuentra en la práctica de la medicina.Lo necesita en áreas tales como la genética, las enfermedades infecciosas y el cáncer.
