polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR) - meetod molekulaarbioloogia, mis võimaldab teil avastada bioloogilise materjali väikestes kogustes desoksüribonukleiinhappe (DNA) või pigem, mõned tema killud, ja korrutab need mitu korda üle.Siis nad olid visuaalselt tuvastatav geelelektroforeesil.Reaction töötati 1983. aastal K. Mullis ja nimekirja kantud täitmata avastused viimastel aastatel.
Mis mehhanismid PCR
kogu tehnika põhineb võime nukleiinhapped sõltumatutele replikatsiooni, mis antud juhul toimub kunstlikult laboritingimustes.DNA replikatsiooni ei ole võimalik alustada igal molekuli alas, kuid ainult teatud piirkondades nukleotiidjärjestus - alustades fragmendid.Et polümeraasi ahelreaktsiooni on alanud, praimereid vaja (või DNA sondid).See lühike fragmendid DNA ahelate ettemääratud nukleotiidjärjestus.Nad täiendavad üksteist (st asjakohane) alustada alade DNA proovi.
muidugi luua praimereid, teadlased peavad õppima nukleotiidjärjestus nukleiinhappe, mis osaleb protseduuri.Need DNA sondide pakkuda reaktsiooni spetsiifilisuse ja selle algatamisest.Polümeraasi ahelreaktsiooni ei lähe, kui proov ei leia vähemalt ühe molekuli soovitud DNA.Üldiselt reaktsiooni nõuab eespool praimereid, nukleotiidide komplektist, kuumakindel DNA polümeraasi.Viimast on ensüüm - katalüüs sünteesi uute nukleiinhappemolekule valimi põhjal.Kõik need ained, sealhulgas bioloogilise materjali, mis on vajalik tuvastada DNA Ühendatud reaktsioonisegus (lahus).See on asetatud spetsiaalne termostaat, mis täidab oma väga kiire kütte- ja jahutussüsteemide määratud aja jooksul - tsükkel.Tavaliselt on nad 30-50.
Kuidas on see reaktsioon
Sisuliselt on see, et ühe perioodi jooksul praimerite on lisatud soovitud osa DNA, mille järel kahekordistub ensüüm.Tuginedes saadud DNA ahel sünteesitakse järgnevad tsüklid ja enam ühesugust molekuli fragmente.
polümeraasi ahelreaktsiooni järjepidevalt pärast selle vabastamist etapis.See iseloomustab esimese kahekordse suurenemise toote iga ravitsükli ajal kütmiseks ja jahutamiseks.Teises etapis reaktsiooni aeglustatakse, sest ensüümi rikutakse ja kaotab aktiivsust.Lisaks depleteeriva reservi ja nukleotiidi praimereid.Viimasel etapil - platoo - tooted on enam kogutud reaktiive üle.
Kus seda kasutatakse
Kahtlemata kõige laiemas taotluse polümeraasi ahelreaktsiooni on meditsiinis ja teaduses.Selle kasutamine avaliku ja erasektori bioloogia, veterinaaria, apteek, ja isegi keskkonda.Kuigi viimane teevad jälgida toidu kvaliteedi ja keskkonna objektide kohta.Aktiivselt kasutatakse polümeraasi ahelreaktsiooni kohtuekspertiisi praktikas kinnitada isaduse ja isiku tuvastamist.Kohtuekspertiisi arstliku läbivaatuse, kui ka paleontoloogia, see meetod on sageli ainus väljapääs, sest tavaliselt on saadaval teadus- väga väike kogus DNA.Muidugi, väga levinud viis on leitud meditsiinis.Ta vajab seda sellistes valdkondades nagu geneetika, nakkushaiguste ja vähi.
