hetkellä, molekyylidiagnostiikan kehittäneet menetelmän, jonka polymeraasiketjureaktion (PCR), joka oli sysäyksen kehittää suuri määrä menetelmiä diagnoosi, joka perustuu määrittämiseen geneettistä materiaalia.Suorittamiseksi reaaliaikainen PCR käyttäen geenifragmentti (erityisesti nukleiinihappo) aiheuttajasta, jota ei löydy muita henkilöitä.
periaate PCR on kertomalla tietyn patogeenin DNA-fragmentti, miljoonia kertoja DNA-polymeraasi on erityinen yksikkö, jota kutsutaan lämpösyklilaite, joka tarjoaa toistaminen lämpötilakierrätyksen järjestelmä ennalta määrätyn ohjelman.
diagnostiikka PCR-tekee mahdolliseksi toistaa sarjan monistuksia, säilyttää entsyymiaktiivisuuden.Kun vahvistus tapahtuu sujuvasti, ja yhden jakson kopiomäärä tietyn venyttää DNA taudinaiheuttaja on kaksinkertaistunut, kolmenkymmenen syklin jälkeen - sata ja kymmenen.Siksi PCR: ää käytetään määrittämään diagnoosi tarpeeksi pieni taudinaiheuttajia, tunnistaminen on mahdotonta ilman sitä.
On syytä huomata, että RNA: ta ei voi olla malli reaaliaikainen PCR-.Näin ollen, jotta voidaan havaita viruksen RNA ennen vahvistusta tarpeen saada DNA korreloi sen vastaava fragmentti.Polymeraasiketjureaktiolla avulla voidaan mitata DNA: han ja RNA: patogeenin.Näin saadut tiedot käytetään tehokkuuden valvonnassa terapian, ja kliininen arviointi ennusteen.
Lisäksi reaaliaikainen PCR ei vaadi ylimääräisiä toimia suhteessa salauksen kohde-DNA tai amplikoneja, jotka toimivat esteenä oikean diagnoosin ja johtaa vääriin tuloksiin.Tämä lähestymistapa mahdollistaa meitä käyttää vaiheessa elektroforeesi, mikä johtaa laskuun saastumisriskin polymeraasiketjureaktiota.Lisäksi, koska lasku on meneillä manipulointi taudinaiheuttaja, vähentää aikaa tutkimuksen, se yksinkertaistaa, vähentää virheiden todennäköisyyttä.PCR myös avulla voit määrittää alkuperäinen määrä kopioita DNA taudinaiheuttaja kliinisessä tutkimuksessa auttaa tunnistamaan kausia pahenemisvaiheiden ja ryhtyä ajoissa toimenpiteisiin parantavan potilaan.
Nykyään on olemassa monia menetelmiä tallentamaan reaaliaikaisen monistuksen.Yleisimmin käytetty erilaisia tekniikoita korreloi amplikonin fluorogeeniset koettimet, säteilyn intensiteetti, joka vaihtelee kertymistä amplikonin ja kirjataan reaaliajassa käyttämällä erityistä välinettä, jota kutsutaan lämpösyklilaitteessa jossa on optinen moduuli.Tämä tarjoaa korkeatasoista herkkyys analyysin.Kun tämä PCR-tuote voidaan havaita, sekä suuri määrä sivutuotteiden, kun taas, kun käytetään elektroforeesia, joissakin tapauksissa se ei ole huomannut.
Kun reaaliaikainen PCR käyttämällä positiivisia ja negatiivisia kontrollinäytteitä.Esimerkiksi, positiiviset ja negatiiviset näytteet tutkimuksessa analysoitiin erillisinä tutkimuksissa, vertailunäyte samalla lisätään kuhunkin näytteeseen ja siirtää kaikki vaiheissa analyysi.
Nykyään on olemassa suuri määrä laitteita suorittamiseksi polymeraasiketjureaktio.Näitä ovat Bio-Rad, Applied Biosystems, Kefeidi ja Roche.Jokaisella on etunsa ja haittansa
On huomattava, että PCR - menetelmä diagnoosi käytetään suuria tieteen, tutkimuksen ja diagnostisten keskuksissa ympäri maailmaa, koska se antaa mahdollisuuden toteuttaa välittömästi tulosten tulkinta.
