polymeraasiketjureaktion (PCR) - menetelmä molekyylibiologian, jonka avulla voit löytää biologisen materiaalin pieniä määriä deoksiribonukleiinihapon (DNA), tai pikemminkin, joitakin sen fragmenttien, ja kerrottava ne moninkertaisesti.Sitten ne tunnistettiin visuaalisesti geelielektroforeesilla.Reaktio kehitettiin 1983 K. Mullis ja sisällyttää luetteloon olevien löydöt viime vuosina.
Mitä mekanismeja PCR-
koko tekniikka perustuu kykyyn nukleiinihappojen itsenäistä replikaatiota, joka tässä tapauksessa tehdään keinotekoisesti laboratorio-olosuhteissa.DNA: n replikaatiota ei voi alkaa missä tahansa molekyylin alueella, mutta vain tietyillä alueilla niin, että nukleotidisekvenssi - alkaen fragmentit.Jotta polymeraasiketjureaktio on alkanut, alukkeet täytyy (tai DNA-koettimet).Tämän lyhyen DNA-fragmentit säikeitä ennalta määrätyn nukleotidisekvenssin.Ne täydentävät (eli asianmukainen) aloittaa sivustoja DNA-näytteen.
tietysti luoda alukkeiden, tutkijat täytyy tutkia nukleotidisekvenssin nukleiinihapon, joka on mukana yhteydessä.Nämä DNA-koettimet tarjoavat reaktion spesifisyys ja sen aloittamista.Polymeraasiketjureaktio ei mene, jos näyte ei löytää ainakin yhden molekyylin halutun DNA.Yleensä reaktio vaatii edellä alukkeet, joukko nukleotideja, lämpöä kestävää DNA-polymeraasia.Jälkimmäinen on entsyymi - katalyyttinen reaktiot synteesi uusia nukleiinihappomolekyylejä perustuen näytteen.Kaikki nämä aineet, kuten biologisen materiaalin, joka on tarpeen tunnistaa DNA: yhdistetään reaktioseoksessa (liuos).Se sijoitetaan erityinen termostaatti, joka suorittaa sen erittäin nopean lämmityksen ja jäähdytyksen määritellyssä ajassa - sykli.Yleensä ne ovat 30-50.
Miten tämä reaktio
ydin on se, että yhden jakson aikana alukkeista on kiinnitetty haluttu osa DNA: ta, jonka jälkeen se kaksinkertaistaa entsyymin.Pohjalta saatu DNA juoste syntetisoitiin myöhemmin syklit ja useampia samanlaisia molekyylin fragmentteja.
polymeraasiketjureaktio on jatkuvasti sen jälkeen, kun vapautuminen vaiheessa.Komissio luonnehti ensin kaksinkertaistaa tuotteen määrä jokaisen jakson aikana lämmityksen ja jäähdytyksen.Toisessa vaiheessa reaktion on hidastunut, koska entsyymi on vaurioitunut ja menettää aktiivisuutta.Lisäksi tyhjenevältä varaukset ja nukleotidin alukkeita.Viimeisessä vaiheessa - tasanne - tuotteet eivät ole enää kerätty reagensseina yli.
Jos sitä käytetään
Epäilemättä laajin sovellus polymeraasiketjureaktio on lääketieteessä ja luonnontieteissä.Sen käyttö julkisten ja yksityisten biologian, eläinlääketieteen, farmasian ja jopa ympäristö.Kun taas jälkimmäinen tekevät valvomaan elintarvikkeiden laatua ja ympäristön esineitä.Aktiivisesti käytetty polymeraasiketjureaktio oikeuslääketieteen käytännössä vahvistaa isyys ja henkilön tunnistamiseen.Oikeuslääketieteen lääkärintarkastus, sekä paleontologian, tämä tekniikka on usein ainoa keino, kuten yleensä tutkimukseen käytettävissä hyvin pieni määrä DNA.Tietenkin hyvin laajalti käytetty menetelmä löytyy käytännössä lääketieteen.Hän tarvitsee sitä sellaisilla aloilla kuten genetiikka, tartuntataudit ja syövän.
