réaction en chaîne de la polymérase (PCR) - une méthode de biologie moléculaire, qui vous permet de découvrir le matériel biologique dans de petites quantités d'acide désoxyribonucléique (ADN), ou plutôt, certains de ses fragments, et les multiplier de nombreuses fois.Ensuite, ils ont été identifiés visuellement par électrophorèse sur gel.La réaction a été développé en 1983 par K. Mullis et inclus dans la liste des découvertes remarquables de ces dernières années.
Quels mécanismes PCR
technique tout est basé sur la capacité des acides nucléiques à la réplication indépendante, qui dans ce cas est menée artificiellement dans des conditions de laboratoire.Réplication de l'ADN ne peut pas commencer dans une région de la molécule, mais seulement dans certaines zones à la séquence nucléotidique - à partir des fragments.Pour que la réaction de polymérisation en chaîne a commencé, les amorces ont besoin (ou des sondes d'ADN).Ces fragments d'ADN courts brins avec une séquence de nucléotides prédéterminée.Ils sont complémentaires (c. appropriée) commencer sites d'échantillon d'ADN.Bien sûr
pour créer amorces, les scientifiques doivent étudier la séquence nucléotidique de l'acide nucléique, qui est impliqué dans la procédure.Ces sondes d'ADN fournissent spécificité de la réaction et de son initiation.La réaction en chaîne de la polymérase ne va pas, si l'échantillon ne trouve pas au moins une molécule de l'ADN désiré.En général, la réaction nécessite des amorces ci-dessus, un ensemble de nucléotides, l'ADN polymérase résistante à la chaleur.Cette dernière est une enzyme - réactions catalytiques de synthèse de nouvelles molécules d'acide nucléique sur la base de l'échantillon.Toutes ces substances, y compris la matière biologique, qui est nécessaire pour identifier l'ADN combiné dans le mélange réactionnel (solution).Il est placé dans un thermostat spécial qui effectue son chauffage et de refroidissement très rapide dans le délai imparti - cycle.Habituellement, ils sont 30-50.
Comment cette réaction est
L'essence de ce qui est pendant un cycle d'amorces sont fixées à la partie souhaitée de l'ADN, après quoi il est doublé par l'enzyme.Sur la base du brin d'ADN synthétisé résultant dans les cycles suivants et des fragments de molécules identiques.
réaction en chaîne de la polymérase est constamment suit sa phase de libération.Il caractérisée par le doublement de la première quantité de produit à chaque cycle de chauffage et de refroidissement.Dans la seconde étape de la réaction est ralentie, car l'enzyme est endommagé et perd son activité.En outre, les réserves d'ozone et des amorces nucléotidiques.Dans la dernière étape - un plateau - les produits ne sont plus collectées sont comme réactifs plus.
où il est utilisé
Sans aucun doute, la plus large de réaction en chaîne de la polymérase est l'application dans la médecine et de la science.Son utilisation en biologie public et privé, la médecine vétérinaire, de la pharmacie, et même l'environnement.Alors que ce dernier font pour surveiller la qualité de la nourriture et des objets de l'environnement.Utilisé activement réaction en chaîne de la polymérase dans la pratique médico-légale pour confirmer la paternité et l'identification d'une personne.L'examen médico-légal, ainsi que dans la paléontologie, cette technique est souvent le seul moyen de sortir, ce qui est habituellement disponible pour la recherche très petite quantité d'ADN.Bien sûr, une méthode très largement utilisé se trouve dans la pratique de la médecine.Il en a besoin dans des domaines tels que la génétique, les maladies infectieuses et le cancer.
