Molekuláris Diagnosztikai: real-time PCR

click fraud protection

Jelenleg molekuláris diagnosztika kifejlesztett egy mechanizmust polimeráz láncreakció (PCR), amely volt a lendület a fejlődés egy nagy számú diagnosztikai módszerek alapján, a meghatározása a genetikai anyagot.Elvégzéséhez valós idejű PCR alkalmazásával gén fragmenst (különösen a nukleinsav) a kórokozót, amely nem található meg más egyének.

PCR elve a szorzás egy bizonyos kórokozó DNS-fragmenst millió alkalommal DNS-polimeráz egy speciális egység, a továbbiakban a thermal cycler, amely ismétlése a hőmérséklet kerékpározás rezsim szerint egy előre meghatározott program.

Diagnostics PCR lehetővé teszi, hogy ismételje meg egy sor amplifikációhoz fenntartása az enzim aktivitását.Ha az erősítés zökkenőmentesen történjen, egy ciklus alatt a példányszámot egy adott DNS-szakaszt a kórokozó megduplázódik, a harminc ciklus - száztíz.Ez az, amiért a PCR meghatározására használják a diagnózis elég kicsi kórokozók, az azonosítása, amelyet lehetetlen nélküle.

Meg kell jegyezni, hogy az RNS nem lehet egy sablont a valós idejű PCR-rel.Ezért, annak érdekében, hogy észlelni virális RNS előtt az amplifikációs megszerzéséhez szükséges egy olyan DNS-korrelál a megfelelő fragmentum.A polimeráz láncreakció lehetővé teszi, hogy mérjük a DNS és RNS a kórokozó.Az így kapott információt megfigyelésére használt a terápia hatékonyságát, és a klinikai értékelés az előrejelzés.

Emellett real-time PCR nem igényel további intézkedést hoz a dekódolás a cél-DNS vagy fragmentumok, amelyek célja a gáton a helyes diagnózis és vezet hamis eredményeket.Ez a megközelítés lehetővé teszi számunkra, hogy nem használja a szakaszában elektroforézis, amely ahhoz vezet, hogy csökken a szennyeződés kockázatát a polimeráz-lánc-reakció.Továbbá, mivel a csökkenés a folyamatban lévő manipuláció a kórokozó, csökkenti azt az időt, amely a felmérés, ez leegyszerűsíti a folyamatot, csökkenti a hibák valószínűségét.PCR is lehetővé teszi, hogy meghatározza a kezdeti példányszámot a DNS a kórokozó egy klinikai vizsgálat, hogy segítsen azonosítani időszakok fellángolások és kellő időben intézkedéseket gyógyítani a beteget.

Ma már sok nyilvántartási módszer a valós idejű erősítés.A leggyakrabban használt különböző módszere korrelált amplikon fluorogén próbákat, a sugárzás intenzitása, amely attól függően változik, a felhalmozódása a amplikon és rögzített valós időben egy speciális eszköz, az úgynevezett thermocycler optikai modult.Ez biztosítja a magas szintű érzékenysége az elemzést.Amikor ez a PCR-termék lehet kimutatni, valamint egy nagy mennyiségű melléktermékek, míg akkor, ha a elektroforézis, néhány esetben ez nem észre.

Amikor real-time PCR segítségével pozitív és negatív ellenőrző mintáit.Például, a pozitív és negatív mintákat a kutatási elemezzük külön vizsgálatokban referencia minta egyidejűleg adtunk minden egyes mintához, és egy pass valamennyi szakaszát az elemzést.

Ma már nagyszámú eszközök elvégzéséhez egy polimeráz-lánc-reakció.Ezek közé tartozik a Bio-Rad, Applied Biosystems, Cepheid és a Roche.Mindegyik vannak előnyei és hátrányai

Meg kell jegyezni, hogy a PCR - módszert használt diagnosztikai a nagy tudományos, kutatási és diagnosztikai központok szerte a világon, mert az ad lehetőséget, hogy végezzen azonnali az eredmények értelmezése.