Polymerase chain reaction (PCR) - metode biologi molekuler, yang memungkinkan Anda untuk menemukan bahan biologis dalam jumlah kecil dari asam deoksiribonukleat (DNA), atau lebih tepatnya, beberapa fragmen, serta melipatgandakan mereka berkali-kali.Kemudian mereka diidentifikasi secara visual oleh gel elektroforesis.Reaksi dikembangkan pada tahun 1983 oleh K. Mullis dan termasuk dalam daftar penemuan luar biasa dari tahun terakhir.
Apa mekanisme PCR
seluruh teknik didasarkan pada kemampuan asam nukleat untuk replikasi independen, yang dalam hal ini dilakukan artifisial dalam kondisi laboratorium.Replikasi DNA tidak bisa mulai di setiap wilayah molekul, namun hanya di daerah tertentu dengan urutan nukleotida - mulai fragmen.Agar reaksi berantai polimerase telah dimulai, primer perlu (atau probe DNA).Ini fragmen pendek DNA helai dengan urutan nukleotida yang telah ditentukan.Mereka saling melengkapi (yaitu sesuai) memulai situs sampel DNA.
saja untuk membuat primer, para ilmuwan harus mempelajari urutan nukleotida dari asam nukleat, yang terlibat dalam prosedur.Probe DNA ini memberikan spesifisitas reaksi dan inisiasi.Polymerase chain reaction tidak akan pergi, jika sampel tidak menemukan setidaknya satu molekul DNA yang diinginkan.Secara umum, reaksi memerlukan primer di atas, satu set nukleotida, panas polimerase DNA tahan.Yang terakhir adalah enzim - reaksi katalitik sintesis molekul asam nukleat baru berdasarkan sampel.Semua zat ini, termasuk materi biologis, yang diperlukan untuk mengidentifikasi DNA digabungkan dalam campuran reaksi (solusi).Hal ini ditempatkan di termostat khusus yang melakukan pemanasan yang sangat cepat dan pendinginan dalam waktu yang ditentukan - siklus.Biasanya mereka 30-50.
Bagaimana reaksi ini
Inti dari itu adalah bahwa selama satu siklus primer yang melekat pada bagian yang diinginkan dari DNA, setelah itu dua kali lipat oleh enzim.Atas dasar untai DNA yang dihasilkan disintesis dalam siklus berikutnya dan fragmen molekul lebih identik.
polymerase chain reaction secara konsisten mengikuti tahap rilis.Ini ditandai dengan pertama menggandakan jumlah produk selama setiap siklus pemanasan dan pendinginan.Pada langkah kedua reaksi melambat, karena enzim tersebut rusak dan kehilangan aktivitas.Selain itu, cadangan menipis dan primer nukleotida.Pada tahap terakhir - dataran tinggi - produk yang tidak lagi dikumpulkan sebagai reagen lebih.
Dimana itu digunakan
Tidak diragukan lagi, luas reaksi berantai polimerase aplikasi adalah dalam bidang kedokteran dan ilmu pengetahuan.Penggunaannya dalam biologi publik dan swasta, kedokteran hewan, farmasi, dan bahkan lingkungan.Sedangkan yang kedua lakukan untuk memantau kualitas makanan dan benda-benda lingkungan.Aktif digunakan polymerase chain reaction dalam praktek forensik untuk mengkonfirmasi ayah dan identifikasi seseorang.Pemeriksaan medis forensik, serta di paleontologi, teknik ini sering satu-satunya jalan keluar, seperti yang biasanya tersedia untuk penelitian jumlah yang sangat kecil dari DNA.Tentu saja, metode yang sangat banyak digunakan ditemukan dalam praktek kedokteran.Dia membutuhkan itu di berbagai bidang seperti genetika, penyakit infeksi dan kanker.
