reazione a catena della polimerasi (PCR) - un metodo di biologia molecolare, che permette di scoprire il materiale biologico in piccole quantità di acido desossiribonucleico (DNA), o meglio, alcuni suoi frammenti, e moltiplicare molte volte sopra.Poi sono stati identificati visivamente mediante elettroforesi su gel.Reazione stato sviluppato nel 1983 da K. Mullis e incluso nell'elenco delle scoperte eccezionali ultimi anni.
Quali meccanismi PCR
intero tecnica si basa sulla capacità di acidi nucleici per la replica indipendente, che in questo caso è condotta artificialmente in condizioni di laboratorio.La replicazione del DNA non può iniziare in qualsiasi regione della molecola, ma solo in alcune zone con la sequenza nucleotidica - frammenti di partenza.Affinché la reazione a catena della polimerasi è iniziata, i primer devono (o sonde di DNA).Questo breve frammenti di DNA trefoli con una sequenza nucleotidica predeterminata.Sono complementari (cioè appropriato) inizio siti di campione di DNA.Naturalmente
creare primer, gli scienziati devono studiare la sequenza nucleotidica del acido nucleico, che è coinvolto nella procedura.Queste sonde di DNA forniscono specificità della reazione e la sua apertura.Reazione a catena della polimerasi non andrà, se il campione non trova almeno una molecola di DNA desiderato.In generale, la reazione richiede i primers sopra, una serie di nucleotidi, DNA polimerasi termoresistente.Quest'ultimo è un enzima - reazioni catalitiche di sintesi di nuove molecole di acido nucleico basati sul campione.Tutte queste sostanze, tra materia biologica, che è necessario individuare DNA combinato nella miscela di reazione (soluzione).Si trova in un termostato speciale che esegue il suo riscaldamento molto rapida e raffreddamento entro il tempo specificato - ciclo.Di solito sono 30-50.
Com'è questa reazione
L'essenza di esso è che durante un ciclo dei primer sono attaccati alla parte desiderata del DNA, dopo di che raddoppia dall'enzima.Sulla base del filamento di DNA derivati sintetizzato nei cicli successivi e frammenti di molecole più identici.
reazione a catena della polimerasi è costantemente seguendo la sua fase di rilascio.È caratterizzato dal primo raddoppiando la quantità di prodotto durante ciascun ciclo di riscaldamento e raffreddamento.Nella seconda fase della reazione viene rallentato, poiché l'enzima è danneggiato e perde attività.Inoltre, le riserve esaurendo e primer nucleotide.Nell'ultima fase - un altopiano - i prodotti non sono più raccolti sono i reagenti oltre.
Dove viene utilizzato
Indubbiamente, la più ampia reazione a catena della polimerasi è l'applicazione in medicina e della scienza.Il suo uso in biologia pubblico e privato, medicina veterinaria, farmacia, e anche l'ambiente.Mentre quest'ultimo stanno facendo per monitorare la qualità degli alimenti e oggetti ambientali.Attivamente usato reazione a catena della polimerasi in pratica forense per confermare la paternità e l'identificazione di una persona.L'esame medico legale, nonché in paleontologia, questa tecnica è spesso l'unica via di uscita, come è generalmente disponibile per la ricerca molto piccola quantità di DNA.Naturalmente, un metodo molto diffuso si trova nella pratica della medicina.Ne ha bisogno in settori quali la genetica, malattie infettive e cancro.
