polimerazės grandininė reakcija (PGR) - tai molekulinės biologijos metodas, kuris leidžia jums atrasti biologinę medžiagą mažais deoksiribonukleorūgšties (DNR), arba, tiksliau, kai kurie jo fragmentai, o jas padaugina daug kartų.Tada jie buvo nustatyti vizualiai gelyje.Reakcija buvo sukurta 1983 metais K. Mullis ir įtraukti į neapmokėtų atradimų pastaraisiais metais sąrašą.
kokie mechanizmai PGR
Visa technika remiasi nukleino rūgščių nepriklausomos replikacija, kuri šiuo atveju yra vykdomos dirbtinai laboratorinėmis sąlygomis galimybes.DNR replikacijos negali prasidėti bet molekulės regione, bet tik tam tikrose srityse, su nukleotidų seka, - pradedant fragmentus.Tam, kad polimerazės grandinės reakcija pradėjo, pradmenys reikia (arba DNR zondų).Šis trumpas fragmentai DNR grandinę su iš anksto nukleotidų sekos.Jie papildo (ty atitinkamai) pradėti svetaines DNR mėginį.
Žinoma sukurti pradmenis, mokslininkai turi ištirti nukleotidų seką nukleino rūgšties, kuri dalyvauja nustatyta tvarka.Šie DNR zondai teikti specifiškumą reakcijos ir jo inicijavimo.Polimerazės grandininė reakcija nebus eiti, jei mėginio negali rasti bent vieną molekulę norimą DNR.Apskritai, reakcijos reikia minėtus pradmenis, nukleotidų rinkinį, karščiui atsparios DNR polimerazę.Pastarasis yra fermentas, - kataliziniai reakcijos sintezės naujų nukleino rūgšties molekulės, remiantis mėginyje.Visi šie medžiagų, įskaitant biologinės medžiagos, kuri yra būtina, siekiant nustatyti DNR kombinuotą reakcijos mišinyje (tirpalo).Jis dedamas į specialų termostatas, kuris atlieka savo labai greitą šildymo ir aušinimo per nustatytą laiką - ciklas.Paprastai jie yra 30-50.
Kaip yra ši reakcija
Iš jo esmė yra ta, per vieną ciklą pradmenų yra pridedami į norimą dalį DNR, po to, kai ji yra sudvejinimą kuri fermento.Ant gauto DNR grandinės sintezuoto kitų ciklų ir daugiau identiškų molekulių fragmentų pagrindu.
polimerazės grandininė reakcija yra nuosekliai po jo atleidimo etapą.Ji pasižymi pirmasis dvigubai produkto kiekį per kiekvieną šildymo ir aušinimo ciklą.Antrame etape reakcijos stabdo, nes fermentas yra pažeistas ir praranda aktyvumą.Be to, ardančių atsargos ir nukleotidų pradmenys.Be paskutiniame etape - plato - produktai nebėra surinkta reagentai daugiau.
Kur jis naudojamas
neabejotinai plačiausia programa polimerazės grandininė reakcija yra medicinoje ir moksle.Jo naudojimas viešojo ir privataus biologija, veterinarijos, farmacijos, ir net aplinka.Nors pastarasis daro stebėti maisto kokybės ir aplinkos objektus.Aktyviai naudojamos polimerazės grandininę reakciją į teismo praktika patvirtina tėvystės ir identifikuoti asmenį.Teismo medicinos medicininis patikrinimas, o taip pat, kaip ir paleontologija, šis metodas yra dažniausiai vienintelis būdas, kad, kaip paprastai yra prieinami tyrimų labai mažu kiekiu DNR.Žinoma, labai plačiai naudojamas metodas yra nustatyta medicinos praktikoje.Jis turi ją tokiose srityse, kaip genetika, infekcinių ligų ir vėžio.
