polimerāzes ķēdes reakciju (PĶR) - metode, molekulārās bioloģijas, kas ļauj atklāt bioloģisko materiālu nelielos daudzumos dezoksiribonukleīnskābes (DNS), vai drīzāk, daži tās fragmenti, un reizinot tos vairākas reizes.Tad tie tika noteikti vizuāli ar gēla elektroforēzi.Reakcija tika izstrādāta 1983. gadā K. Mullis un iekļauti sarakstā izciliem atklājumiem pēdējos gados.
kādi mehānismi PĶR
visa tehnika ir balstīta uz spēju nukleīnskābes neatkarīgiem replikācijas, kas šajā gadījumā tiek veikta mākslīgi laboratorijas apstākļos.DNS replikācija nevar sākties jebkurā reģionā, molekulas, bet tikai atsevišķos apgabalos, kuros ir nukleotīdu secību - sākot fragmentus.Lai uz polimerāzes ķēdes reakcija ir sākusies, gruntis nepieciešama (vai DNS zondes).Šis īsais fragmenti DNS pavedienus ar iepriekš noteiktu nukleotīdu sekvenci.Viņi viens otru papildina (ti, gadījumā) sāk vietnes DNS paraugu.
Protams, lai izveidotu gruntskrāsas, zinātnieki ir izpētīt nukleotīdu secību nukleīnskābes, kas ir iesaistīts šajā procedūrā.Šie DNS zondes nodrošināt reakcijas specifiskuma un tās sākuma.Polimerāzes ķēdes reakcija nebūs iet, ja paraugs nav atrast vismaz vienu molekulu no vēlamā DNS.Kopumā reakcija prasa iepriekšminētos gruntis, kopums nukleotīdi, karstuma izturīga DNS polimerāzes.Pēdējais ir ferments - katalītiskās reakcijas sintēzes jaunu nukleīnskābes molekulas, pamatojoties uz parauga.Visas šīs vielas, tostarp bioloģiskā materiāla, kas ir nepieciešams, lai noteiktu DNS kombinēto reakcijas maisījumu (šķīdums).Tas tiek ievietots speciālā termostatu, kas veic tās ļoti strauju apkures un dzesēšanas noteiktajā laikā - cikla.Parasti tie ir 30-50.
Kā tas ir reakcija
No tā būtība ir tāda, ka laikā, viens cikls gruntis ir pievienoti vajadzīgā daļa DNS, pēc tam to ir divkāršojies, ko enzīms.Pamatojoties uz iegūtajiem DNS virzienu sintezēts turpmākajos ciklos un vairāk vienādas molekulu fragmenti.
polimerāzes ķēdes reakcijas ir konsekventi pēc tās atbrīvošanas stadijā.Tas raksturo vispirms dubultojot apjomu produkta katra cikla apkures un dzesēšanas laikā.Otrajā posmā reakcijas palēninās, jo ferments ir bojāts un zaudē aktivitāti.Turklāt noārdošu rezerves un nukleotīdu gruntis.Pēdējā posmā - plato - produkti vairs nav iekasēti reaģenti vairāk.
Ja tiek izmantots
Neapšaubāmi, visplašāko polimerāzes ķēdes reakcija ir medicīnā un zinātnē.Tās izmantošana publiskajā un privātajā bioloģijā, veterinārmedicīnā, farmācijā, un pat videi.Bet tā dara, lai uzraudzītu pārtikas kvalitātes un vides objektus.Aktīvi izmanto polimerāzes ķēdes reakciju, kas tiesu praksē, lai apstiprinātu, paternitātes un identificēt personu.Tiesu medicīnas medicīniskā pārbaude, kā arī paleontoloģija, šī tehnika ir bieži vienīgā izeja, kā tas parasti ir pieejams pētniecības ļoti nelielu daudzumu DNS.Protams, ir ļoti plaši lietotā metode ir atrodama medicīnas praksē.Viņam tas ir nepieciešams tādās jomās kā ģenētika, infekcijas slimībām un vēzi.
