łańcuchowa polimerazy (PCR) - metoda biologii molekularnej, która pozwala odkryć materiału biologicznego w małej ilości kwasu dezoksyrybonukleinowego (DNA), a raczej niektóre jego fragmenty, i pomnożyć je wiele razy.Następnie zostały one identyfikowane wizualnie za pomocą elektroforezy w żelu.Reakcja została stworzona w 1983 roku przez K. Mullisa i wpisany na listę wybitnych odkryć ostatnich lat.
jaki mechanizm PCR
cała technika jest oparta na zdolności kwasów nukleinowych do niezależnych replikacji, które w tym przypadku prowadzi się sztucznie w warunkach laboratoryjnych.Replikacja DNA nie może rozpocząć się w dowolnym regionie cząsteczki, lecz tylko w pewnych obszarach z sekwencji nukleotydowej - od fragmentów.W rozpoczęła zamówienie na reakcji łańcuchowej polimerazy, startery potrzeby (lub sond DNA).To krótkie fragmenty DNA pasma o określonej sekwencji nukleotydowej.Są one komplementarne (czyli odpowiednio) rozpocznie miejsc próbki DNA.Oczywiście
do utworzenia primerów, naukowcy muszą badać sekwencję nukleotydów kwasu nukleinowego, który bierze udział w procesie.Te sondy DNA zapewniają swoistość reakcji i jego wszczęcia.Łańcuchowa reakcja polimerazy nie udać, jeśli próbka nie znajdzie się co najmniej jedną cząsteczkę DNA pożądanego.Na ogół, reakcja wymaga powyższych starterów, zestaw nukleotydów, odporny polimerazy DNA ciepła.Ten ostatni jest enzym - Reakcje katalityczne syntezę nowych cząsteczek kwasów nukleinowych w oparciu o próby.Wszystkie z tych substancji, w tym substancji biologicznych, które są potrzebne do identyfikacji DNA połączone w mieszaninie reakcyjnej (w roztworze).Jest on umieszczony w specjalnym termostatem, który wykonuje swoje bardzo szybkie nagrzewanie i chłodzenie w określonym czasie - cyklu.Zazwyczaj są one 30-50.
Jak to reakcja
Istotą jest to, że w trakcie jednego cyklu starterów są dołączone do żądanego fragmentu DNA, po czym jest podwojenie przez enzym.Na podstawie otrzymanej nici DNA zsyntetyzowanego w kolejnych cyklach oraz więcej identycznych fragmentów cząsteczek.Reakcja łańcuchowa polimerazy
konsekwentnie po jego etap zwalniania.Charakteryzuje się pierwszy podwojenie ilości produktu w czasie każdego cyklu nagrzewania i chłodzenia.W drugim etapie reakcja ulega spowolnieniu, ponieważ enzym jest uszkodzony i traci aktywność.Ponadto zastrzega wyczerpanie lub startery nukleotydowe.W ostatnim etapie - plateau - produkty nie są już zbierane są odczynniki ponad.
Gdzie jest stosowany
Niewątpliwie najszerszy reakcja łańcuchowa polimerazy aplikacja jest w medycynie i nauce.Jego zastosowanie w publicznym i prywatnym biologii, weterynarii, farmacji, a nawet środowiska.Podczas gdy te ostatnie są robi w celu monitorowania jakości żywności oraz obiektów ochrony środowiska.Aktywnie wykorzystywane łańcuchowej reakcji polimerazy w praktyce sądowej w celu potwierdzenia ojcostwa i identyfikacji osoby.Obdukcji medycznej, jak również w paleontologii, ta technika jest często jedynym wyjściem, jak to zwykle dostępne do badań bardzo małej ilości DNA.Oczywiście, szeroko stosowanym sposobem znajduje się w praktyce medycznej.On potrzebuje go w takich dziedzinach, jak genetyka, choroby zakaźne i nowotwory.
