reação em cadeia da polimerase (PCR) - um método de biologia molecular, que permite que você descubra o material biológico em pequenas quantidades de ácido desoxirribonucléico (DNA), ou melhor, alguns de seus fragmentos, e multiplicá-los muitas vezes.Em seguida, eles foram identificados visualmente por electroforese em gel.A reacção foi desenvolvida em 1983 por K. Mullis e incluído na lista de descobertas pendentes dos últimos anos.
Que mecanismos de PCR
técnica baseia-se em toda a capacidade dos ácidos nucleicos para a replicação independente, que neste caso é realizado sob condições laboratoriais artificialmente.A replicação do ADN não pode começar em qualquer região da molécula, mas apenas em determinadas áreas com a sequência nucleotídica - a partir de fragmentos.Para que a reacção de polimerase em cadeia começou, os iniciadores precisa (ou sondas de ADN).Esta curta fragmentos de DNA vertentes com uma sequência de nucleótidos predeterminado.Eles são complementares (isto é, apropriado) locais de início da amostra de ADN.Naturalmente
para criar iniciadores, os cientistas devem estudar a sequência de nucleótidos do ácido nucleico, que está envolvida no processo.Estas sondas de ADN proporcionam especificidade da reacção e a sua iniciação.Reação em cadeia da polimerase não vai, se a amostra não encontrar pelo menos uma molécula do DNA desejado.Em geral, a reacção requer os iniciadores acima, um conjunto de nucleótidos do ADN, polimerase resistente ao calor.O último é uma enzima - reacções catalíticas de síntese de novas moléculas de ácido nucleico com base na amostra.Todas estas substâncias, incluindo a matéria biológica, que é necessária para identificar o DNA combinado na mistura reaccional (solução).Ele é colocado em um termostato especial que executa seu aquecimento muito rápido e de arrefecimento dentro do tempo especificado - ciclo.Geralmente eles são 30-50.
Como esta reacção é
A essência disto é que, durante um ciclo dos iniciadores estão ligados à porção de ADN desejada, após o que é dobrando pela enzima.Na base da cadeia de ADN resultante sintetizada nos ciclos subsequentes e fragmentos de moléculas mais idênticos.
reação em cadeia da polimerase é constantemente seguinte ao da sua fase de lançamento.É caracterizada pela primeira duplicando a quantidade de produto durante cada ciclo de aquecimento e arrefecimento.No segundo passo da reacção é retardada, uma vez que a enzima está danificado e perde actividade.Além disso, as reservas esgotar-se e iniciadores nucleotídicos.Na última etapa - um platô - os produtos já não são recolhidos como reagentes over.
onde é usado
Sem dúvida, a mais ampla reação em cadeia da polimerase aplicação é na medicina e na ciência.Seu uso em biologia público e privado, medicina veterinária, farmácia, e até mesmo o meio ambiente.Enquanto o último está fazendo para monitorar a qualidade da comida e objetos do ambiente.Usado ativamente reação em cadeia da polimerase na prática forense para confirmar a paternidade e identificação de uma pessoa.O exame médico forense, assim como em paleontologia, esta técnica é muitas vezes a única saída, como é geralmente disponíveis para a investigação quantidade muito pequena de DNA.Claro que, um método muito utilizado é encontrado na prática da medicina.Ele precisa dela em áreas como a genética, doenças infecciosas e câncer.
