reacție în lanț a polimerazei (PCR) - o metodă de biologie moleculară, care vă permite să descoperiți materialul biologic în cantități mici de acid dezoxiribonucleic (ADN), sau mai degrabă, o parte din fragmentele sale, și le multiplica de multe ori.Apoi au fost identificate vizual prin electroforeză în gel.Reacție a fost dezvoltat în 1983 de către K. Mullis și incluse în lista de descoperiri remarcabile din ultimii ani.
Ce mecanisme PCR
întreaga tehnică se bazează pe capacitatea de acizi nucleici la replicare independent, care, în acest caz, se desfășoară în mod artificial în condiții de laborator.Replicarea ADN-ului nu poate începe în orice regiune a moleculei, dar numai în anumite zone cu secvența de nucleotide - incepand fragmente.Pentru reacția de polimerizare în lanț a început, primerii au nevoie (sau sonde ADN).Acest scurte fragmente de ADN catenele cu o secvență de nucleotide predeterminată.Ele sunt complementare (de exemplu, este cazul) începe site-uri de probă de ADN.Desigur
pentru a crea primeri, oamenii de stiinta trebuie sa studieze secvența de nucleotide a acidului nucleic, care este implicat în procedura de.Aceste sonde de ADN furnizează specificitatea reacției și inițierea acesteia.Reacție în lanț a polimerazei nu va merge, în cazul în care proba nu găsește cel puțin o moleculă de ADN dorit.În general, reacția necesită primeri de mai sus, un set de nucleotide, căldură ADN polimerazei rezistent.Acesta din urmă este o enzimă - reacții catalitice de sinteză a noilor molecule de acid nucleic, pe baza eșantionului.Toate aceste substanțe, inclusiv materiei biologice, care este necesară pentru a identifica ADN combinat, în amestecul de reacție (soluție).Acesta este plasat într-un termostat special care efectuează încălzirea ei foarte rapidă și răcire în termenul specificat - ciclu.De obicei, acestea sunt 30-50.
Cum este această reacție
Esența este că pe parcursul unui ciclu de primeri sunt atașate la porțiunea dorită de ADN, după care se dublează de enzima.Pe baza catenei ADN rezultat sintetizat în ciclurile următoare și fragmentele molecula mai identice.
reacție în lanț a polimerazei urmărește în mod constant faza de lansare.Se caracterizează prin prima dublarea cantității de produs în timpul fiecărui ciclu de încălzire și răcire.În a doua etapă a reacției este încetinită, deoarece enzima este deteriorat și pierde activitatea.În plus, rezervele de diminuare a stratului și primeri de nucleotide.În ultima etapă - un platou - produsele nu mai sunt colectate ca reactivi peste.
În cazul în care se utilizează
Fără îndoială, cel mai larg reacția în lanț a polimerazei aplicare este în medicină și știință.Utilizarea sa in biologie public și privat, medicină veterinară, farmacie, și chiar a mediului.În timp ce acestea din urmă fac pentru a monitoriza calitatea produselor alimentare și a obiectelor de mediu.Folosit în mod activ reacție în lanț a polimerazei în practica medico-legală a confirma paternitate și de identificare a unei persoane.Examinarea medico-legală, precum și în paleontologie, aceasta tehnica este adesea singura cale de ieșire, așa cum este, de obicei disponibile pentru cercetare cantitate foarte mică de ADN-ului.Desigur, o metodă foarte utilizate pe scară largă se regăsește în practica medicina.El are nevoie de ea în domenii cum ar fi genetica, boli infectioase si a cancerului.
