polymerázová reťazová reakcia (PCR) - metóda molekulárnej biológie, ktorý vám umožní objavovať biologický materiál v malých množstvách deoxyribonukleovej kyseliny (DNA), či skôr, niektoré jeho fragmenty, a množte sa im mnohokrát.Potom boli identifikované vizuálne gélovou elektroforézou.Reakcia bola vyvinutá v roku 1983 K. Mullis a zaradená do zoznamu vynikajúcich objavov posledných rokov.
aké mechanizmy PCR
celá technika je založená na schopnosti nukleových kyselín do nezávislej replikácie, ktorý je v tomto prípade vykonávaných umelo za laboratórnych podmienok.DNA replikácie nemôže začať v ľubovoľnej oblasti molekuly, ale len v určitých oblastiach s nukleotidovej sekvencie - počnúc fragmenty.Aby polymerázovej reťazovej reakcie začala, priméry potrebujú (alebo DNA sond).Táto krátka fragmentov reťazcov DNA s vopred stanoveným nukleotidovej sekvencie.Oni sú komplementárne (tj vhodné) začnú miesta vzorky DNA.
Samozrejme pre vytvorenie primérov, musia vedci študovať nukleotidovej sekvencie nukleovej kyseliny, ktorá sa podieľa na riadení.Tieto DNA sondy poskytujú špecifickosti reakcie a jeho začatí.Polymerázová reťazová reakcia nepôjde, v prípade, že vzorka nenájde aspoň jednu molekulu požadovanej DNA.Všeobecne platí, že reakcia vyžaduje vyššie uvedené primery, sadu nukleotidov, odolný voči teplu DNA polymerázu.Tá je enzým, - katalytické reakcie syntézy nových molekúl nukleových kyselín na základe vzorky.Všetky tieto látky, vrátane biologickej hmoty, ktorá je nutná pre identifikáciu DNA v kombinácii v reakčnej zmesi (roztoku).Je umiestnený v špeciálnom termostatom, ktorý vykonáva jeho veľmi rýchly ohrev a chladenie v stanovenej lehote - cyklus.Obvykle sú 30-50.
Ako je to reakcia
Podstatou je, že v priebehu jedného cyklu primérov sú pripojené k požadovanej časti DNA, načo sa zdvojnásobuje enzýmom.Na základe výsledného reťazca DNA syntetizované v následných cyklov a viac rovnakých molekulových fragmentov.
polymerázová reťazová reakcia je dôsledne po jeho vydaní fázy.Je charakterizovaná tým, že najprv zdvojnásobenie množstva produktu v priebehu každého cyklu vykurovania a chladenia.V druhom kroku reakcie sa spomaľuje, pretože enzým je poškodený a stráca aktivitu.Okrem toho vrstvu rezervy a nukleotidových primery.V poslednej fáze - náhornej plošine - tieto produkty už nie sú zhromažďované ako činidlá nad.
Tam, kde je použitý
Nepochybne najširšie aplikácie polymerázová reťazová reakcia je v medicíne a vede.Jeho použitie vo verejnom aj súkromnom biológiu, veterinárnej medicíny, farmácie, a dokonca aj životné prostredie.Zatiaľ čo druhá robia pre sledovanie kvality potravín a predmetov ochrany životného prostredia.Aktívne používa polymerázovej reťazovej reakcie v súdnej praxi na potvrdenie otcovstva a identifikáciu osoby.Forenznú lekárske vyšetrenie, rovnako ako v paleontológii, táto technika je často jediným spôsobom, že, ako je obvykle k dispozícii pre výskum veľmi malého množstva DNA.Samozrejme, veľmi široko používaný spôsob sa nachádza v lekárskej praxi.On ju potrebuje v takých oblastiach, ako je genetika, infekčných chorôb a rakoviny.
