verižne reakcije s polimerazo (PCR) - metoda molekularne biologije, ki vam omogoča, da odkrijete biološki material v majhnih količinah kislino (DNK), ali bolje, nekatere njegove fragmente, in jih pomnožite veliko krat več.Nato so vidno označene z gelsko elektroforezo.Reakcija je bila razvita leta 1983 K. Mullis in vključena v seznam neporavnanih odkritij v zadnjih letih.
Kateri mehanizmi PCR
celotna tehnika temelji na sposobnosti nukleinskih kislin do samostojnega razmnoževanja, ki je v tem primeru izvajajo umetno v laboratorijskih pogojih.Replikacije DNA ne more začeti v katerikoli regiji molekule, vendar le v določenih območjih z zaporedjem nukleotidov - od fragmentov.V je začela nalog za polimerazno verižno reakcijo, primerji potrebujejo (ali sonde DNA).Ta kratka fragmenti DNA pramenov z vnaprej določeno nukleotidno sekvenco.So komplementarni (tj primerno) začeti mest vzorca DNK.
seveda ustvariti primerji, znanstveniki morajo študirati nukleotidno zaporedje nukleinske kisline, ki sodeluje v postopku.Te DNA sonde zagotavljajo specifičnost reakcije in njeno uvedbo.Verižna reakcija s polimerazo ne bo šlo, če vzorec ne najde vsaj eno molekulo želeno DNA.Na splošno velja, da reakcijo zahteva zgoraj primerjev, niz nukleotidov, odporen na vročino, DNA-polimerazo.Slednji je encim - katalitične reakcije sinteze novih molekul nukleinske kisline, ki temeljijo na vzorcu.Vse te snovi, vključno biološkega materiala, ki je potrebna, da prepoznajo DNK vezane v reakcijski zmesi (raztopina).To se nahaja v posebnem termostatom, ki opravlja svojo zelo hitro ogrevanje in hlajenje v določenem času - cikla.Običajno so 30-50.
Kako je ta reakcija
Bistvo tega je, da pri ena ciklus primerjev vezana na želeno odsek DNA, po katerem je podvojitev z encimom.Na osnovi nastalega sklopa DNA sintetiziranega v naslednjih ciklih in več enakimi fragmentov molekule.
verižna reakcija s polimerazo je dosledno sledi svojo stopnjo sproščanja.Je označen s prvim podvoji količino proizvoda med vsakim ciklom ogrevanja in hlajenja.V drugem koraku reakcije je upočasnila, saj je encim poškodovan in je izgubil aktivnost.Poleg tega so pojenjajočih zalog in nukleotidna primerja.V zadnji fazi - planoti - izdelki niso več zbirali, kot reagenti konec.
Kadar se uporablja
nedvomno najširša uporaba verižne reakcije s polimerazo v medicini in znanosti.Njegova uporaba v javnem in zasebnem biologije, veterine, farmacije, in celo okolje.Medtem ko slednji počnejo za spremljanje kakovosti hrane in okoljskih objektov.Aktivno uporabljajo verižne reakcije s polimerazo v forenzično praksi za potrditev očetovstva in identifikacijo osebe.Forenzični zdravniški pregled, kot tudi v paleotologije, ta tehnika je pogosto edini izhod, kot je običajno na voljo za raziskovalne zelo majhno količino DNK.Seveda je zelo razširjena metoda najdemo v medicinski praksi.On jo potrebuje na področjih, kot so genetika, nalezljivih bolezni in raka.
