polymeraskedjereaktion (PCR) - en metod för molekylärbiologi, vilket gör att du kan upptäcka det biologiska materialet i små mängder deoxiribonukleinsyra (DNA), eller snarare en del av dess fragment, och multiplicera dem många gånger om.Sedan var de identifierade visuellt genom gelelektrofores.Reaktion utvecklades 1983 av K. Mullis och ingår i listan över utestående upptäckter de senaste åren.
vilka mekanismer PCR
hela teknik är baserad på förmågan hos nukleinsyror till oberoende replikation, vilket i detta fall är utförda artificiellt under laboratorieförhållanden.DNA-replikation kan inte börja i en region av molekylen, men bara i vissa områden med nukleotidsekvensen - start fragment.För polymeraskedjereaktionen har startat, primrarna behöver (eller DNA-prober).Detta korta fragment av DNA-strängar med en förutbestämd nukleotidsekvens.De kompletterar varandra (dvs lämpligt) start platser av DNA-prov.
kurs för att skapa primers forskarna måste studera nukleotidsekvensen av nukleinsyra, som är involverat i förfarandet.Dessa DNA-sonder ger specificitet reaktionen och den inleddes.Polymeraskedjereaktion kommer inte att gå, om provet inte hitta minst en molekyl av det önskade DNA.I allmänhet kräver reaktionen ovannämnda primrar, en uppsättning nukleotider, värmebeständigt DNA-polymeras.Det sistnämnda är ett enzym - katalytiska reaktioner för syntes av nya nukleinsyramolekyler baserade på provet.Samtliga dessa substanser, inklusive biologiskt material, vilket är nödvändigt för att identifiera DNA som kombineras i reaktionsblandningen (lösning).Den placeras i en speciell termostat som utför sin mycket snabb uppvärmning och kylning inom den angivna tiden - cykel.Vanligtvis de är 30-50.
Hur är denna reaktion
Kärnan i det är att under en cykel av primrarna är fästa till den önskade delen av DNA: t, varefter den fördubbling av enzymet.På grundval av det resulterande DNA-strängen syntetiseras i efterföljande cykler och flera identiska molekylfragment.
polymeraskedjereaktion är konsekvent efter frisläppandet skede.Det kännetecknas av först fördubbla mängden produkt under varje cykel av värme och kyla.I det andra steget av reaktionen långsammare, eftersom enzymet är skadad och förlorar aktivitet.Dessutom nedbrytande reserver och nukleotidprimers.I det sista steget - en platå - produkterna inte längre samlas som reagens över.
När den används
Otvivelaktigt är det bredaste tillämpning polymeraskedjereaktion inom medicin och vetenskap.Dess användning i offentliga och privata biologi, veterinärmedicin, farmaci, och även miljön.Medan den senare gör för att övervaka livsmedelskvalitet och miljöobjekt.Används aktivt polymeraskedjereaktion i kriminalteknisk praxis att bekräfta faderskap och identifiering av en person.Den rättsmedicinska utredningen, liksom i paleontologi, är denna teknik ofta den enda utvägen, som är vanligtvis tillgänglig för forskning mycket liten mängd DNA.Naturligtvis är en mycket allmänt använd metod finns i läkekonsten.Han behöver det inom områden som genetik, infektionssjukdomar och cancer.
