Praegu molekulaardiagnostikaks töötatud mehhanism polümeraasi ahelreaktsiooni (PCR), mis oli hoog arengut suur hulk diagnoosi-, mis põhineb määramiseks geneetilist materjali.Läbiviimiseks reaalaja PCR lehe geeni fragment (eelkõige nukleiinhape) haigustekitajat, mis ei ole leitud teisi isikuid.
põhimõtet PCR on paljunemise teatud patogeeni DNA fragment miljoneid kordi DNA polümeraasi eriüksus, mida nimetatakse termotsüklistit, mis näeb kordamine termotsükleerimist režiimi vastavalt ettemääratud programmi.
Diagnostics PCR võimaldab korrata mitmeid amplifikatsioonideks, säilitades ensüümi aktiivsust.Kui võimendamine toimub sujuvalt, ühes tsüklis koopiate arv on eriti venitada DNA patogeeni on kahekordistunud, pärast kolmkümmend tsüklit - sada kümme.Sellepärast PCR määramiseks kasutatakse diagnoosimiseks piisavalt väike patogeenide tuvastamiseks mis on võimatu ilma selleta.
Tuleb märkida, et RNA ei saa olla malli reaalaja PCR.Seega selleks, et avastada viirusliku RNA enne võimendamist vaja saada DNA korrelatsioonis selle vastav fragment.Polümeraasi ahelreaktsiooni võimaldab mõõta DNA ja RNA patogeeni.Viisil saadud teabe kasutamise järelevalve tõhusust ravi ja kliiniline hindamine prognoosi.
Lisaks reaalaja PCR ei vaja lisameetmeid seoses dekodeerimiseks sihtmärgi DNA või amplikonid, mis toimib takistusena õige diagnoosi ja viia valesid tulemusi.Selline lähenemine võimaldab meil mitte kasutada etapis elektroforeesi mis viib vähenemist saastumise ohtu polümeraasi ahelreaktsiooni.Lisaks sellele, kuna vähenemisega mitme poolelioleva manipuleerimine patogeen, vähendab uuringu ajal, see lihtsustab, vähendab tõenäosust vigu.PCR võimaldab teil määrata ka mitu eksemplari DNA patogeeni kliinilises uuringus, mis aitavad kindlaks perioodid ägenemiste ja võtta õigeaegselt meetmeid, et patsient terveks.
Täna on palju meetodeid salvestamise reaalajas võimendamine.Levinuim erinevaid võtteid korrelatsioonis amplikon fluorogeenset sondide kiirguse intensiivsus sõltub kogunemine amplikon ja registreeritakse reaalajas kasutades ERIVAHENDIGA, nimetatakse termotsükleris optiline moodul.See tagab kõrgetasemelise tundlikkuse analüüsi.Kui see PCR produkti võib tuvastada, koos suure koguse kõrvalsaaduste samas, kui kasutatakse elektroforeesi mõningatel juhtudel ei ole märganud.
Kui reaalaja PCR abil positiivsete ja negatiivsete kontrollproovide.Näiteks positiivsed ja negatiivsed proovid teadus analüüsiti eraldi uuringutes võrdlusproov samal ajal lisatakse igasse proovi ja pass kõik etapid analüüsi.
Täna on suur hulk seadmeid läbiviimiseks polümeraasi ahelreaktsiooni.Nendeks Bio-Rad, Applied Biosystems, Cepheid ja Roche.Igal neist on plussid ja miinused
Tuleb märkida, et PCR - meetod diagnoosi kasutatakse suurte teadus-, uurimis- ja diagnostika keskused üle maailma, sest see annab võimaluse teostada vahetut tulemuste tõlgendamisel.
