שרשרת פולימראז (PCR) - שיטה של ביולוגיה מולקולרית, המאפשרת לך לגלות את החומר הביולוגי בכמויות קטנות של חומצה דאוקסיריבונוקלאית (DNA), או לייתר דיוק, חלק מהברים שלה, ולהכפיל אותם פעמים רבות.ואז הם זוהו חזותי על ידי ג'ל אלקטרופורזה.תגובה פותחה בשנת 1983 על ידי ק 'מוליס ונכללה ברשימה של תגליות בולטות של השנים האחרונות.כל טכניקת
המנגנונים מה PCR
מבוססת על היכולת של חומצות גרעין לשכפול עצמאי, אשר במקרה זה מתבצע באופן מלאכותי בתנאי מעבדה.שכפול הדנ"א לא יכול להתחיל בכל אזור של המולקולה, אלא רק באזורים מסוימים ברצף נוקליאוטידים - החל ברים.על מנת שתגובת השרשרת של פולימראז החל, פריימרים צריכים (או בדיקות DNA).שברים קצרים זה של ה- DNA גדילים עם רצף נוקליאוטידים שנקבע מראש.הם משלימים (כלומר מתאימים) להתחיל אתרים של דגימת DNA.כמובן
ליצור פריימרים, מדענים חייבים ללמוד את רצף נוקליאוטידים של חומצות גרעין, העוסקות בהליך.בדיקות DNA אלה מספקות הספציפיות של התגובה והייזום שלה.תגובת השרשרת של פולימראז לא תלך, אם המדגם אינו מוצא מולקולה אחת לפחות של ה- DNA הרצוי.באופן כללי, התגובה דורשת פריימרים לעיל, קבוצה של נוקלאוטידים, DNA פולימראז עמיד בחום.האחרון הוא אנזים - תגובות קטליטי של סינתזה של מולקולות חומצות גרעין חדשות המבוססות על המדגם.כל החומרים האלה, כוללים חומר ביולוגי, אשר יש צורך לזהות DNA המשולב בתערובת התגובה (פתרון).היא ממוקמת בתרמוסטט מיוחד שמבצע חימום שלה מאוד מהיר וקירור בתוך הזמן המוגדר - מחזור.בדרך כלל הם 30-50.
איך היא תגובה זו
המהות שלו היא כי במהלך מחזור אחד של פריימרים מחוברים לחלק הרצוי של DNA, לאחר שהיא מכפילה את ידי האנזים.על בסיס גדיל DNA וכתוצאה מכך מסונתז במחזורים שלאחר מכן ושברי מולקולה יותר זהים.תגובת השרשרת של פולימראז
עוקבת באופן עקבי שלב השקתו.זה מאופיין על ידי ההכפלה ראשונה הסכום של מוצר בכל מחזור של חימום וקירור.בשלב השני של התגובה הוא האט, מאז האנזים פגום ומאבד את הפעילות.בנוסף, עתודות המרוקנות ופריימרים נוקלאוטיד.בשלב האחרון - רמה - המוצרים כבר לא נאסף כריאגנטים מעל.
שם הוא משמש
אין ספק, תגובת השרשרת של פולימראז היישום הרחב ביותר היא ברפואה ומדע.השימוש בו בביולוגיה ציבורית ופרטית, רפואת וטרינרית, בית מרקחת, ואפילו הסביבה.בזמן האחרון עושה כדי לפקח על איכות מזון וחפצים סביבתיים.בשימוש פעיל תגובת השרשרת של פולימראז בפרקטיקה המשפטית כדי לאשר אבהות והזדהות של אדם.הבדיקה המשפטית רפואית, כמו גם בפליאונטולוגיה, טכניקה זו היא לעתים קרובות הדרך היחידה החוצה, כפי שהיא בדרך כלל זמין עבור כמות קטנה מאוד של מחקר ה- DNA.כמובן, שיטה מאוד נפוצה נמצאת בפרקטיקה של רפואה.הוא צריך את זה בתחומים כמו גנטיקה, מחלות זיהומיות וסרטן.
